免费黄网站-免费黄网站在线看-免费黄色-免费黄色a-亚洲va欧美va国产-亚洲va中文字幕欧美不卡

技術文章您的位置:網站首頁 >技術文章 > 南京信帆生物:IPTG誘導蛋白表達的原理及方法步驟
南京信帆生物:IPTG誘導蛋白表達的原理及方法步驟
更新時間:2016-04-20   點擊次數:1252次

E.coli的乳糖操縱子(元)含Z、Y及A三個結構基因,分別編碼半乳糖苷酶、透酶和乙酰基轉移酶,此外還有一個操縱序列O、一個啟動序列P及一個調節基因I。I基因編碼一種阻遏蛋白,后者與O序列結合,使操縱子(元)受阻遏而處于關閉狀態。在啟動序列P上游還有一個分解(代謝)物基因激活蛋白(CAP)結合位點。由P序列、O序列和CAP結合位點共同構成lac操縱子的調控區,三個酶的編碼基因即由同一調控區調節,實現基因產物的協調表達 。在沒有乳糖存在時,lac操縱子(元)處于阻遏狀態。此時,I序列在PI啟動序列操縱下表達的Lac阻遏蛋白與O序列結合,阻礙RNA聚合酶與P序列結合,抑制轉錄起動。當有乳糖存在時,lac操縱子(元)即可被誘導。在這個操縱子(元)體系中,真正的誘導劑并非乳糖本身。乳糖進入細胞,經b-半乳糖苷酶催化,轉變為半乳糖。后者作為一種誘導劑分子結合阻遏蛋白,使蛋白構象變化,導致阻遏蛋白與O序列解離、發生轉錄。異丙基硫代半乳糖苷(IPTG)是一種作用*的誘導劑,不被細菌代謝而十分穩定,因此被實驗室廣泛應用。

材料

1、誘導表達材料

( 1 ) LB (Luria―Bertani))培養基

酵母膏 (Yeast extract) 5g 蛋白胨 (Peptone) 10g

NaCl 10g 瓊脂 (Agar) 1-2%

蒸餾水 (Distilled water) 1000ml pH 7.0

適用范圍:大腸桿菌(Escherichia coli)

( 2 ) IPTG 貯備液:2 g IPTG溶于10 mL 蒸餾水中,0 . 22 μm 濾膜過濾除菌,分裝成1 mL /份,-20 ℃ 保存。

( 3 ) l× 凝膠電泳加樣緩沖液:

50 mmol / L Tris -CI ( pH 6 . 8 )

50 mmol / L DTT

2 % SDS (電泳級)

0.1 % 溴酚藍

10 % 甘油

2、大腸桿菌(Escherichia coli)包涵體的分離與蛋白純化材料

1 )酶溶法

(1)裂解緩沖液:

50 mmol / L Tris-CI ( pH 8 . 0 )

1 mmol / L EDTA

100 mmol / LNaCI

(2)50 mmol / L 苯甲基磺酰氟(PMSF )。

(3)10 mg / mL 溶菌酶。

(4)脫氧膽酸。

(5)1 mg / mL DNase I。

elisa試劑盒,進口elisa試劑盒,放射免疫試劑盒,amresco,Gibco培養基-南京信帆生物技術有限公司

網站首頁 關于我們 新聞中心 產品中心 聯系我們
備案號:蘇ICP備16008122號-3   GoogleSitemap   技術支持:環保在線 管理登陸
© 2018 南京信帆生物技術有限公司(m.hengchuai.cn) 版權所有 總訪問量:665325
主站蜘蛛池模板: 亚洲欧美日本人成在线观看 | 伊人五月天婷婷琪琪综合 | 一本色道久久综合亚洲精品 | 欧美精品久久久久久久久大尺度 | 欧美在线观看a | 亚洲天堂美女视频 | 成人精品在线视频 | 亚洲成人黄色网址 | 精品三级内地国产在线观看 | 免费视频亚洲 | 能看毛片的网址 | 久久精品国产亚洲7777小说 | 久久午夜鲁丝片午夜精品 | 久久国产精品99久久小说 | 国产成人综合网在线观看 | 高清国产美女一级毛片 | 影院成人区精品一区二区婷婷丽春院影视 | 日本www色视频成人免费网站 | 美女扒开双腿让男人爽透视频 | 日韩女人做爰大片 | 深夜福利亚洲 | 国产欧美专区在线观看 | 欧美一区二区三区精品国产 | 国产精品九九 | 亚洲久久成人 | 久久免费精品国产视频 | www.91免费视频 | 久久精品国产影库免费看 | 成人自拍视频网站 | 亚洲大片| 欧美视频自拍偷拍 | 成人欧美一级毛片免费观看 | 亚洲一区二区免费看 | 六月成人网 | 国产1000部成人免费视频 | 美女视频永久黄网站在线观看 | 久久99国产精品免费观看 | 国产一区二区三区亚洲综合 | 亚洲精品久久精品h成人 | 欧美一区二区三区久久久人妖 | 日韩最新中文字幕 |